衰老導致的機體功能減退和老年性疾病嚴重影響人類的健康與壽命，是生命科學領域的重大課題?；跉饨j學說構(gòu)建的精氣神理論提出“腎精虛衰”是衰老根本、“元氣虧虛”是衰老關鍵、“形神耗損”是衰老表現(xiàn)的中醫(yī)衰老病機，及補腎填精、燮理陰陽、溫扶元氣、充養(yǎng)形神的抗衰老治法，制定八子補腎膠囊組方。實驗研究證實八子補腎膠囊具有改善整體衰老、系統(tǒng)衰老及防治衰老相關疾病的特色優(yōu)勢，初步臨床研究證實可提高運動能力、改善性功能，有望成為中醫(yī)藥抗衰老的代表中成藥。

　　八子補腎膠囊的抗整體衰老作用

　　在防治整體衰老方面，研究證實八子補腎膠囊可增強抵抗外界刺激能力，延長秀麗隱桿線蟲壽命;改善衰老小鼠虛弱指數(shù)及整體外觀表型;通過維持細胞端粒酶活性并延長端粒、上調(diào)長壽蛋白SIRT6和下調(diào)衰老相關蛋白P53表達、抗炎、抗氧化發(fā)揮延緩衰老作用。臨床研究證實，八子補腎膠囊顯著改善腎精虧虛癥狀群表現(xiàn)(腰膝酸痛、神疲乏力、健忘、畏寒肢冷、頭暈耳鳴、性欲減退等)。

　　增強抵抗外界刺激能力

　　延長秀麗隱桿線蟲壽命

　　研究顯示，熱量限制信號通路和衰老密切相關，激活熱量限制信號相關通路可顯著上調(diào)機體抗氧化水平，增強抗氧化應激能力，進而延長壽命。研究觀察八子補腎膠囊對熱應激條件下秀麗隱桿線蟲存活時間的影響，結(jié)果顯示，八子補腎膠囊對線蟲的平均存活時間、最大壽命及半數(shù)壽命均有不同程度的延長作用，且呈劑量依賴性，提示八子補腎膠囊可能通過增強線蟲的抗熱應激能力而延長線蟲壽命。

　　改善自然衰老小鼠

　　虛弱指數(shù)和外觀狀態(tài)

　　2020年美國哈佛醫(yī)學院遺傳學教授大衛(wèi)·辛克萊(DavidSinclair)領導的研究小組首次對衰老小鼠的衰弱程度變化進行追蹤，建立小鼠虛弱指數(shù)(FI)作為快速評估衰老程度的工具，通過對被毛狀況、皮毛顏色喪失情況、皮炎、腫瘤、腹脹、脊柱后凸、尾巴變硬、步態(tài)障礙、震顫、前肢抓力、身體狀況核心、前庭功能，白內(nèi)障、角膜容量、眼部分泌物、視力反射、鼻涕、咬合不正、直腸脫垂、陰道子宮陰莖脫垂、腹瀉、呼吸速率深度、立毛等70項指標觀察，衡量衰老個體的健康狀況和易受不良后果影響的程度。FI評分優(yōu)于其他侵入性檢測方法，作為一種低成本高效益、無創(chuàng)的綜合健康指標，為探索預測機體健康狀況和預期壽命提供了新的系統(tǒng)表型研發(fā)方法。研究以13月齡C57自然衰老小鼠為模型，以雷帕霉素作為陽性對照藥物，用藥8周后(15月齡)觀察小鼠的整體外觀狀態(tài)，并采用虛弱指數(shù)對小鼠健康情況進行量化評估，結(jié)果顯示:自然衰老組的小鼠出現(xiàn)脫毛、毛色變白，精神狀態(tài)不佳，活動減少等衰老相關表現(xiàn)，八子補腎膠囊組的小鼠皮毛黑亮濃密，精神狀態(tài)良好，活動正常，顯著降低了小鼠的虛弱指數(shù)(P<0.01)，對小鼠的視力、前庭功能、皮下囊性腫物發(fā)生率等指標有明顯改善作用(圖一)，其作用效果不同程度地優(yōu)于雷帕霉素。

圖一八子補腎膠囊改善小鼠虛弱指數(shù)和外觀狀態(tài)

　　改善D-氨基半乳糖衰老模型

　　小鼠臟器指數(shù)和外觀狀態(tài)

　　D-氨基半乳糖(D-gal)可以誘導建立亞急性衰老動物模型。研究人員通過建立D-gal誘導的衰老小鼠模型，評價八子補腎膠囊的抗衰老作用，給藥周期60天。結(jié)果顯示:與模型組比較，八子補腎膠囊可維持衰老小鼠體重，明顯提高腦、脾、胸腺臟器指數(shù)(圖一);且八子補腎膠囊組的衰老小鼠毛色烏黑亮澤，濃密，無脫毛現(xiàn)象，精神狀態(tài)良好，活動正常。表明八子補腎膠囊可延緩整體衰老，改善外觀狀態(tài)。

　　調(diào)節(jié)長壽蛋白和衰老相關蛋白水平

　　調(diào)節(jié)端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶活性

　　最新研究發(fā)現(xiàn)，壽命長短與沉默調(diào)節(jié)蛋白6(Sirt6)蛋白密切相關，其被稱為“長壽蛋白”。Sirt6通過抗癌基因P53及其下游效應因子、端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)起到保持DNA穩(wěn)定性和端粒完整性的作用，P53的不穩(wěn)定可導致Sirt6表達減少，進而誘發(fā)機體衰老。研究顯示TERT活性降低也會影響線粒體功能、氧化還原動態(tài)平衡及端粒完整性?？梢姡岣逽irt6和TERT基因蛋白表達水平有可能恢復機體活力，減輕衰老引起的多種病理改變，對于保持DNA穩(wěn)定性和端粒完整性，以及延長壽命具有重要意義。通過建立D-gal和亞硝酸鈉(NaNO2)誘導的衰老小鼠模型評價八子補腎膠囊的作用，結(jié)果顯示八子補腎膠囊能夠上調(diào)海馬和肝臟組織中的長壽蛋白Sirt6的表達水平，降低衰老相關蛋白P53的表達水平，上調(diào)TERT蛋白表達水平。表明八子補腎膠囊可能通過上調(diào)Sirt6水平，下調(diào)P53表達，上調(diào)TERT蛋白表達而促進DNA損傷修復并提高端粒酶活性，從而發(fā)揮抗衰老作用。

　　改善炎癥和氧化損傷

　　研究報道，8-羥基脫氧鳥苷(8-OHDG)作為評價DNA氧化損傷程度的生物標志物，可客觀反映機體氧化損傷程度;總抗氧化物(TAC)、乳酸脫氫酶(LDH)等是反映組織氧化損傷程度和抗氧化潛在能力的重要指標;促炎細胞因子TNF-α、IFN-γ通過上調(diào)衰老相關蛋白成為促發(fā)細胞衰老的重要因素。采用D-gal和NaNO2誘導的衰老小鼠模型評價八子補腎膠囊的抗炎、抗氧化能力，結(jié)果顯示八子補腎膠囊能夠顯著升高血清IL-2、INF-γ水平、降低TNF-α水平，同時能夠降低血清LDH、8-OH-dG含量，增加TAC水平。表明八子補腎膠囊可通過減輕炎癥和氧化損傷發(fā)揮抗衰老作用。

　　改善腎精虧虛患者的癥狀表現(xiàn)

　　河北醫(yī)科大學第二醫(yī)院、河北省人民醫(yī)院、河北醫(yī)科大學第三醫(yī)院觀察八子補腎膠囊對腎精虧虛患者的癥狀改善作用，共納入90例腎精虧虛證患者，隨機分為試驗組(60例，口服八子補腎膠囊，2粒/次，3次/日)和對照組(30例，口服五子衍宗丸，4粒/次，3次/日)，療程30天。結(jié)果顯示八子補腎膠囊有以下療效優(yōu)勢:①明顯提高治療總有效率(試驗組90%對比對照組66.7%)和顯效率(試驗組46.7%對比對照組23.3%)(P<0.01);②顯著改善腰膝酸痛、神疲乏力、健忘、畏寒肢冷、頭暈耳鳴、性欲減退等腎精虧虛癥狀(P<0.01)，且對畏寒肢冷、健忘、性欲減退癥狀的改善作用優(yōu)于對照組(P<0.05);③顯著降低中醫(yī)證候總積分(試驗組8.56±3.63vs 對照組5.93±2.82)(P<0.01)。表明八子補腎膠囊對腎精虧虛癥狀有良好改善作用。

　　八子補腎膠囊的抗系統(tǒng)衰老作用

　　八子補腎膠囊對心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)、肌肉系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)的功能減退及衰老相關疾病均表現(xiàn)出確切改善作用，實驗研究顯示能夠有效抑制動脈粥樣硬化斑塊形成，改善心功能;改善認知功能;促進骨合成，抑制骨分解，提高骨強度;改善肌肉耐力、抓力及平衡力;改善睪丸形態(tài)和生精功能，提高精子質(zhì)量。臨床研究證實可顯著提高運動機能，有效緩解疲勞;改善陽痿患者的性激素水平，提高性功能。

　　心血管系統(tǒng)

　　(1)抑制雙側(cè)卵巢切除小鼠動脈粥樣硬化:黃丹等采用高脂飼料喂養(yǎng)加雙側(cè)卵巢切除建立小鼠早衰模型，同時使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)誘導人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)模擬動脈粥樣硬化內(nèi)皮細胞損傷模型，觀察八子補腎膠囊對動脈粥樣硬化的作用。結(jié)果顯示，八子補腎膠囊能夠調(diào)節(jié)血脂水平，顯著降低總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平，顯著升高高密度脂蛋白(HDL-C)水平，且調(diào)節(jié)血脂作用略優(yōu)于G1;改善血清代謝物譜，提高血清二十二碳六烯酸、3-羥基丁酸和5(Z)、8(Z)、11(Z)二十碳三烯酸的含量，并降低溶血磷脂酰乙醇胺(18:0)含量;能夠提高血清雌二醇水平，且無刺激子宮增生的作用;能夠縮小斑塊面積;抑制斑塊內(nèi)巨噬細胞及T細胞的聚集，減輕炎癥細胞浸潤，并顯著下調(diào)p-IκBα/IκBα和p-p65/p65蛋白表達量比率，通過抑制NF-κB信號通路活化，降低VCAM-1和ICAM-1表達水平;明顯抑制內(nèi)皮細胞凋亡，促進抗凋亡基因Bcl-2表達，減少促凋亡基因Bax表達，降低裂解半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleavedcaspase3)/caspase3比率，進一步研究顯示八子補腎膠囊的上述作用與激活雌激素受體有關。表明八子補腎膠囊能夠改善脂代謝，且具有植物雌激素樣作用，能夠提高模型小鼠雌激素水平，激活雌激素受體，通過雌激素受體依賴途徑系統(tǒng)減輕血管炎癥反應，抑制血管內(nèi)皮細胞凋亡，減少動脈粥樣硬化斑塊形成(圖二)。

圖二 八子補腎將囊降低斑塊面積

　　(2)改善雙側(cè)卵巢切除小鼠心功能:心臟中線粒體表達豐富，線粒體參與心臟各個階段的多種生理及病理活動，其功能的完整性在心臟正常生理功能的維持中起到重要作用，心臟中大量功能異常的線粒體堆積既是心臟衰老的標志，也是引起衰老的起始原因。艾靜等采用雙側(cè)卵巢切除建立小鼠早衰模型，評價八子補腎膠囊對心功能的改善作用。結(jié)果顯示，八子補腎膠囊能夠改善左心室射血分數(shù)，減少心肌細胞線粒體周圍脂滴數(shù)目，縮小線粒體面積，表明其可能通過減輕線粒體損傷改善心功能(圖三)。

圖三 八子補腎膠囊改善左室射血分數(shù)

　　(3)改善自然衰老小鼠心功能:衰老可導致心臟收縮舒張功能異常，研究表明與年齡相關的心肌收縮力下降、心臟后負荷增加等因素是衰老引起左心室收縮功能下降的主要原因。毛昕菁等采用自然衰老小鼠模型評價八子補腎膠囊對心功能的改善作用。結(jié)果顯示，八子補腎膠囊能夠改善攝血分數(shù)、短軸縮短率、心輸出量和左心室質(zhì)量，減少心臟膠原纖維增生，表明其改善心功能的作用可能與減少心臟纖維沉積有關，其更深入的機制研究正在開展當中。

　　神經(jīng)系統(tǒng)

　　(1)改善D-gal+NaNO2衰老模型小鼠的認知功能:多種因素引發(fā)的胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)失衡誘導細胞衰老會影響腦功能，加速腦衰老進程，造成神經(jīng)細胞功能結(jié)構(gòu)損傷及學習記憶能力、感覺和運動協(xié)調(diào)能力的下降。張東偉等采用D-gal+NaNO2衰老小鼠模型評價八子補腎膠囊對認知功能的改善作用(圖四)，結(jié)果顯示八子補腎膠囊能夠明顯改善衰老小鼠的學習記憶功能，縮短水迷宮實驗和跳臺實驗的潛伏期、降低犯錯次數(shù);抑制氧化自由基生成，抑制促凋亡蛋白caspase-3、Bax的表達，促進抗凋亡蛋白Bcl-2的表達，抑制細胞凋亡;提高大腦皮層線粒體的活性，改善線粒體功能;提高SIRT6水平，降低P53的表達，提高端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(TERT)和核受體轉(zhuǎn)錄輔助活化因子-1a(PGC-1a)的表達，改善端粒微環(huán)境，抑制端粒消耗，提高海馬端粒長度。表明八子補腎膠囊可能通過維持氧化還原穩(wěn)態(tài)和端粒完整性改善認知功能，其機制可能與調(diào)節(jié)Sirt6/NRF2/HO-1和Sirt6/P53-PGC-1α-TERT信號通路激活有關。

圖四 八子補腎膠囊改善認知功能

　　(2)改善D-gal衰老模型小鼠的認知功能:腦衰老進程中，多種因素引發(fā)的胞內(nèi)穩(wěn)態(tài)失衡可以誘導細胞衰老，衰老細胞可分泌大量衰老相關因子，引起組織慢性炎癥及結(jié)構(gòu)功能變化，進而影響腦功能，表現(xiàn)出學習記憶能力、感覺和運動協(xié)調(diào)能力下降。集川原等采用D-gal衰老小鼠模型評價八子補腎膠囊對認知功能的改善作用，結(jié)果顯示八子補腎膠囊能夠縮短巴恩斯迷宮實驗的潛伏時間、減少錯誤次數(shù)，調(diào)節(jié)腦組織和血漿中衰老相關因子水平，升高抗炎因子水平并降低促炎因子水平，并正在進行更深入的機制研究。

　　(3)改善雙側(cè)卵巢切除小鼠認知功能:雌激素在調(diào)節(jié)中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng)的生長、發(fā)育、分化中發(fā)揮重要作用，阿爾茨海默病患者中女性約占2/3.且女性患者的整體病理改變重于男性，這與雌激素水平下降密切相關。艾靜等采用雙側(cè)卵巢切除小鼠模型評價八子補腎膠囊對認知功能的改善作用，結(jié)果顯示八子補腎膠囊能夠顯著改善空間學習記憶能力和新物體識別記憶能力，提高筑巢能力，減少海馬和皮層衰老細胞數(shù)量，并正在進行更為系統(tǒng)深入的機制研究。

　　骨骼系統(tǒng)

　　(1)改善D-gal+NaNO2衰老模型小鼠的骨強度:張東偉等采用D-gal+NaNO2腹腔注射建立小鼠衰老模型，評價八子補腎膠囊對骨質(zhì)量的改善作用。結(jié)果顯示，八子補腎膠囊能夠改善骨強度，提高彈性模量、極限載荷和最大應力;改善骨微結(jié)構(gòu)，抑制股骨微結(jié)構(gòu)破壞、改善骨材料構(gòu)成;調(diào)節(jié)氧化還原平衡，提高T-AOC、SOD、GSH、GSH/GSSG水平、降低MDA水平;進一步研究顯示八子補腎膠囊可能通過調(diào)節(jié)Sirt6/NF-κB /cathepsin K信號通路改善衰老小鼠骨質(zhì)量。

　　(2)改善雙側(cè)卵巢切除小鼠的骨強度:王丹東等采用雙側(cè)卵巢切除小鼠模型評價八子補腎膠囊對骨強度的改善作用，結(jié)果顯示，八子補腎膠囊能夠顯著升高雌二醇水平，調(diào)節(jié)骨代謝，促進骨形成，抑制骨分解，改善脛骨遠端骨微結(jié)構(gòu)，增加相對骨體積、骨小梁密度和厚度，降低骨分離度。表明八子補腎膠囊可以通過升高雌激素水平改善骨強度，其進一步的機制正在研究當中。

　　肌肉系統(tǒng)

　　(1)改善衰老小鼠肌耐力、平衡力:骨骼肌衰弱是衰老最突出的特征之一，其特征是肌肉質(zhì)量和功能的喪失。毛昕菁等采用自然衰老小鼠評價八子補腎膠囊對肌肉功能的改善作用，結(jié)果顯示，八子補腎膠囊能夠增加懸掛試驗的懸掛時長，增加轉(zhuǎn)棒實驗的時間和路程。集川原等采用D-gal小鼠衰老模型評價八子補腎膠囊對骨質(zhì)量的改善作用，結(jié)果顯示，八子補腎膠囊能夠增加懸掛時長、提高抓力，增加轉(zhuǎn)棒時長和路程。上述研究表明八子補腎膠囊能改善小鼠的肌肉耐力、抓力和平衡力。

　　(2)提高人體運動功能:研究人員觀察在賽前訓練期服用八子補腎膠囊對男子田徑運動員的影響，結(jié)果顯示，服用八子補腎膠囊可以維持內(nèi)分泌穩(wěn)定，改善運動性低血清睪酮;改善蛋白質(zhì)代謝平衡紊亂，減少運動性蛋白尿;提高T淋巴細胞免疫功能，改善運動性免疫抑制;維持血白細胞、紅細胞及血紅蛋白水平，改善運動性貧血;升高血清SOD水平，維持氧化還原平衡，減輕運動性脂質(zhì)過氧化損傷;提高機體神經(jīng)調(diào)節(jié)能力和對環(huán)境的適應能力，改善運動后自主神經(jīng)系統(tǒng)紊亂;降低機體在定量刺激下的電位水平，改善運動后生物電系統(tǒng)紊亂。表明八子補腎膠囊可以顯著改善機體運動功能，減少運動后疲勞的發(fā)生。研究人員觀察在賽前準備期和比賽期服用八子補腎膠囊對男子足球運動員的影響，結(jié)果顯示，服用八子補腎膠囊可以維持體重，增加肌肉量而減少脂肪重量，降低體脂率;維持運動耐力，提高無氧功率和相對無氧功率平均值，提高無氧運動能力;維持運動后血清睪酮水平穩(wěn)定;提高血清乳酸脫氫酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力。值得關注的是，國家反興奮劑檢測研究中心的報告顯示八子補腎膠囊不含有興奮劑等任何違禁成分。

　　生殖系統(tǒng)

　　(1)改善大鼠交配能力:研究顯示八子補腎膠囊能夠縮短雄鼠撲捉雌鼠的潛伏期，增加單位時間內(nèi)撲捉雌鼠的次數(shù)。

　　(2)改善單側(cè)睪丸切除大鼠的性機能:研究人員采用單側(cè)睪丸切除大鼠模型評價八子補腎膠囊對其性功能的影響，結(jié)果顯示，八子補腎膠囊可以提高血清睪酮和皮質(zhì)醇水平，升高副性器官指數(shù)(包皮腺指數(shù)、精囊腺+前列腺指數(shù))。

　　(3)改善自然衰老小鼠生精功能:研究人員觀察八子補腎膠囊對自然衰老小鼠生精功能的影響，結(jié)果顯示，自然衰老小鼠睪丸生精小管中各級生精細胞及精子細胞數(shù)量較少，且排列疏松;而八子補腎組小鼠生精小管內(nèi)各級生精細胞及精子細胞數(shù)量較多，排列整齊緊密;此外，八子補腎膠囊對睪丸指數(shù)無影響，表明八子補腎膠囊可以顯著改善小鼠生精功能且無生殖毒性。

　　(4)改善D-gal+NaNO2衰老模型小鼠的睪丸形態(tài)和生精功能:張東偉等采用D-gal+NaNO2衰老小鼠模型評價八子補腎膠囊的生精功能，結(jié)果顯示，八子補腎膠囊可以通過調(diào)節(jié)睪丸Sirt6/P53通路和Sirt6/NF-κBp65通路改善血清氧化還原的平衡，提高小鼠性激素水平，改善睪丸組織形態(tài)，提高睪丸線粒體復合體Ⅳ活性，從而改善精子超微結(jié)構(gòu)，并提高精子的數(shù)量和質(zhì)量，包括提高精子活率、鞭打頻率、直線速度、曲線速度、平均路徑速度、側(cè)擺幅度、向前性和直線性。表明八子補腎膠囊可以通過調(diào)控上壽蛋白Sirt6相關信號通路，提高精子數(shù)量和質(zhì)量。

　　(5)改善陽痿及繼發(fā)性陽痿患者癥狀:研究人員通過臨床研究評價八子補腎膠囊對不同類型陽痿患者的療效，結(jié)果顯示240例陽痿患者服用八子補腎膠囊的痊愈率為11.25%，總有效率為90.83%，最快見效時間為20天，平均見效時間為54天。在60例2型糖尿病繼發(fā)性陽痿患者中，顯效率為61.7%，總有效率為96.7%，最快10天見效，平均45天見效。在60例腎虛型陽痿患者中，顯效率為51.7%，總有效率為83.3%，并且能夠顯著改善中醫(yī)證候評分，降低勃起功能國際問卷評分，提高血清睪酮水平和性交成功率。

　　總結(jié)

　　綜上所述，八子補腎膠囊對于整體衰老及心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、骨骼系統(tǒng)、肌肉系統(tǒng)、生殖系統(tǒng)的功能減退和相關疾病均表現(xiàn)出確切改善作用。目前研究顯示八子補腎膠囊的抗衰老機制主要包括上調(diào)長壽蛋白Sirt6水平，下調(diào)衰老相關蛋白P53水平，上調(diào)端粒逆轉(zhuǎn)錄酶水平，減輕炎癥和氧化反應。其抗衰老作用主要體現(xiàn)為提高性激素水平，抑制動脈粥樣硬化形成，改善心功能;提高學習記憶認知能力，改善神經(jīng)功能;改善骨質(zhì)疏松，提高運動功能;提高精子數(shù)量和質(zhì)量，改善性功能?？傮w而言，氣絡學說指導八子補腎膠囊抗衰老研究充分體現(xiàn)了“理論-新藥-實驗-臨床”中醫(yī)學術創(chuàng)新與轉(zhuǎn)化新模式，為中醫(yī)藥抗衰老研究做出了示范。